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Informazioni di Base.
Descrizione del Prodotto
Proteinasi K (liofilizzato, Ultra pure)
| N. CAT | NOME DEL PRODOTTO | DIMENSIONI | PREZZO |
| C12100 | Proteinasi K (liofilizzato, Ultra pure) | 1 g | 312.00 dollari |
| C12101 | Proteinasi K (liofilizzato, Ultra pure) | 10 g | 2,602.00 dollari |
| C12102 | Proteinasi K (liofilizzato, Ultra pure) | 100 g. | 23,410.00 dollari |
| PDB-1000 | PDB buffer | 1000 ml | 300.00 dollari |
△ Introduzione
La proteinasi K è una serina proteasi stabile con ampia specificità del substrato. Degrada molte proteine allo stato nativo anche in presenza di detergenti. Non viene attivato da metalioni, agenti chelanti (ad esempio EDTA), reagenti sulfidrilici, o da inibitori della tripsinor chimotripsina. È stabile su un ampio intervallo di pH (4-12.5), con attività ottimale a pH 6.5-9.5. L'attività può essere stimolata mediante l'aggiunta di agenti denaturanti (SDS e urea). La denaturazione rapida dell'enzima avviene a temperatura superiore a 70°C. L'autolisi dell'enzima si verifica sempre più a pH alcalino.
Tuttavia, la Proteinasi K non è completamente inattivata dall'autolisi. Alcuni frammenti enzimatici continuano a mantenere la loro completa attività proteolitica, anche dopo un'estesa autolisi.
La proteinasi K viene frequentemente utilizzata in applicazioni di biologia molecolare per digerire proteine indesiderate, come nucleasi in preparazioni di DNA o RNA da microrganismi, cellule coltivate e piante. L'enzima viene tipicamente usato a 50-200 μg/ml in preparazioni di acido nucleico a pH 7.5-8.0 e 37-55°C. I tempi di incubazione variano da 30 minuti a 18 ore.
△ specifiche
| Caratteristiche | Specifiche |
| Peso molecolare | 29,3 kDa |
| Punto isoelettrico | 8.9 |
| Aspetto | Polvere liofilizzata bianca |
| Purezza | 95% (analisi SDS-PAGE) |
| Attività specifica | ≥30 unità/mg di proteina |
| Caratteristica di temperatura | La temperatura di attività effettiva è 37-70°C, e l'attività enzimatica a 65°C è due volte quella a 25°C. |
| Caratteristiche DEL PH | 4.0-12.0, la gamma ottimale è ph7,5-11.5 |
| Condizioni di conservazione | Si raccomanda di conservare a -20°C per garantire la massima stabilità dell'attività (il trasporto o la conservazione a temperatura normale non ridurranno l'attività enzimatica). La durata a magazzino è di 3 anni a -20°C e di 2 anni a 2-8 °C. |
| Metodo di utilizzo | Preparare 20 mg/ml con la soluzione, aggiungere la proteinasi K alla soluzione digestiva o al lisato fino a quando la concentrazione finale è di 50-200 ug/ml e incubare a 55-70°C. La proteinasi K dopo la reazione può essere rimossa o inattivata mediante metodo con perline magnetiche, metodo a colonna o estrazione con cloro in forma di phe nol. La proteasi K può essere inattivata mediante incubazione a 95°C per 3 minuti o a 70°C per 15 minuti. |
| Rilevamento dei residui di acido nucleico | Qubit non ha rilevato Contaminazione da DNA umano non rilevata (PCR in tempo reale) Nota: la proteasi K 1g viene usata per l'estrazione dell'acidoacido nucleico ed eluita mediante 40ul di tampone di eluizione. |
| Rilevamento nucleasi | DNasi non rilevata RNasi non rilevata |
| Applicazione consigliata | Estrazione di acido nucleico, estrazione di acido nucleico virale |
△ vantaggi
- Non incluse RNasi, DNasi e nichel
- Nessun residuo di acido nucleico (Non rilevato da Qubit dopo l'estrazione della proteina 100 mg intera K)
- Nessuna contaminazione da DNA di origine umana (non rilevata da Q-PCR)
- Nessuna contaminazione batterica da DNA (non rilevata da primer universale 16S)
- Nessuna contaminazione da DNA fungino (non rilevata da primer universale 1TS)
- Può essere trasportato e valido per due anni a temperatura normale in condizioni di asciutto.
- Può essere utilizzato per estrazione di DNA libero altamente sensibile, estrazione di acido nucleico virale, estrazione di DNA di sangue intero, ecc.
△ informazioni per l'ordinazione
| Contenuto | C12100 | C12101 | C12102 | PDB-1000 |
| Proteinasi K, liofilizzata, >30 unità/mg di proteina | 1 g | 10 g | 100 g | |
| Tampone PDB (Tris 20 mm, pH 7.5, CaCl2 10 mm, glicerolo 50%, conservanti 0.1%) | 1000 ml |
